En 1534 fué nombrado adelantado del Río de la Plata don Pedro de Mendoza, y en 1 de septiembre del mismo año partió de Sanlúcar con una poderosa armada.La expedición fué harto desdichada, sin más rasgos salientes que la fundación de Buenos Aires, y la exploración del Río de la Plata y Paraná por el asesino de Juan de Ayolas.Mendoza, de salud precaria murió y fué sepultado en el 1 de mar, de regreso de España.